凱氏定氮法是由荷蘭科學家凱道爾于1833年創(chuàng)建的，已經(jīng)發(fā)展趨勢為變量定義、少量、平少量凱氏定氮法及其全自動定氮儀法等，是剖析有機化學化合物中氮量的常見方式。凱氏定氮法的理論基礎(chǔ)是蛋白中的中氮量一般占其總品質(zhì)的16%上下(12%~一19%),因而，根據(jù)測量物質(zhì)中的中氮量便可估計出物質(zhì)中的總蛋白質(zhì)含量(假定測量物質(zhì)中的氮全來源于蛋白)，即:蛋白質(zhì)含量=中氮量/16%。
凱氏定氮法是測量化合物或化合物中高錳酸鹽指數(shù)量的一種方式。即在有金屬催化劑的標準下，用硫酸消化吸收試品將有機化學氮都轉(zhuǎn)化成無機物氨鹽，隨后在偏堿標準下將氨鹽轉(zhuǎn)換為氨，隨水蒸氣蒸餾出去并為過多的硼酸溶液液消化吸收，再以標準鹽酸滴定管，就可測算出試品中的氮量。因為蛋白中氮量較為穩(wěn)定，可由其氮量計算蛋白質(zhì)含量，故此方法是經(jīng)典的蛋白定量分析方式。
凱氏定氮法基本原理
蛋白是中氮的有機化學化合物。蛋白與硫酸和金屬催化劑一同加溫消化吸收，使蛋白質(zhì)分解，溶解的氨與鹽酸融合轉(zhuǎn)化成硫酸銨。隨后脫灰水蒸氣蒸餾使氨分散，用硼酸溶液消化吸收后再以鹽酸或鹽酸標液滴定管，依據(jù)酸的使用量乘于計算指數(shù)，并計算成蛋白質(zhì)含量。中氮量*6.25=蛋白質(zhì)成分
1.有機化合物中的氨在強熱和CuSO4，濃H2SO4功效下，硝化反應(yīng)轉(zhuǎn)化成（NH4)2SO4
凱氏定氮法
反應(yīng)方程為：
2.在凱氏定氮器中與堿功效，根據(jù)水蒸氣蒸餾釋放出來NH3，搜集于H3BO3水溶液中
反應(yīng)方程為:
3.用己知濃度值的H2SO4（或HCI）標液滴定管，依據(jù)HCI耗費的量計算出氮的成分，隨后乘于相對的計算因素，即得蛋白的成分
反應(yīng)方程為：
或
凱氏定氮法實驗試劑
全部實驗試劑均用沒有氨的純凈水配置。
2.1硫代硫酸鈉。
2.2硫酸銨。
2.3鹽酸。
2.4 2%硼酸溶液。
2.5混和標示液：1份0.1%甲基紅乙醇溶液與5份0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混和。也能用2份0.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混和。
2.6 30%氫氧化鈉溶液水溶液。
2.7 0.025mol/L鹽酸標液或0.05mol/L鹽酸標液。
